Jeffrey Cross
Jeffrey Cross

Како изоловати амнионске матичне ћелије из плаценте, код куће

Атила пише како да изолује солате амнионске матичне ћелије из плаценте, код куће - то би требало да генерише много разговора… проверите то, комплетне кораке и разговарајте!

„Постељица је веома вриједно људско ткиво, иако правилно рециклирање није плацентофага, већ изолација матичних ћелија из амнионског слоја и чување за каснију регенеративну сврху за целу породицу. Људске амнионске епителне ћелије (ХАЕЦс) из плаценте су алтернативне замене људских ембрионалних матичних ћелија и имају потенцијал да се диференцирају у сва три клице ин витро. Ове ћелије су веома блиске онима раније и широко мултипотентним матичним ћелијама из амнионске течности, које су у последње време изазвале велику бузз на вебу, које су објавили Де Цоппи, Атала ет ал. у Натуре Биотецхнологи. Овде бих желео да вам покажем, иако не дајем никакву гаранцију и не могу дати никакву гаранцију, да изоловање матичних ћелија из плаценте није теже од прављења одрезака и уз правилну припрему, улагање и време можете то учинити чак и на кући или у лабораторији за изнајмљивање. Процес је етички неспоран, јер се постељица обично одбацује након рођења. Данас је терапија матичним ћелијама само обећавајућа могућност, али у не тако далекој будућности, самоосвесни грађани могу управљати својим матичним ћелијама, узгајати их у гаражи и складиштити у фрижидеру. Ако је тако, то би могао бити облик самосталног медицинског самоосигурања. Налазимо се у зору биодији покрета подржаног науком отвореног кода, за људе. Проблем биологије Маке Бацкиард био је кориштен, јер је изумио основни језик биоДИИ-а или биотехнологије у кући или гаражи. Ево алгоритма у цртаном филму и испод су детаљни, мада не и саморегулативни текстуални протокол. Више детаља ће доћи касније, ако буде затражено. "

Остатак слике и информације након скока… .Повезати на слику у пуној величини - овдје.

1. Гооглисе људске амнионске матичне ћелије и потенцијал терапије матичним ћелијама. То није чињеница већ обећавајућа могућност.

2. Посавјетујте се с неким стручњаком о цијелом пољу (можете прескочити овај корак, ако сте самоувјерени).

3. Разговарајте са трудним чланом породице (или вашим познаницима) мјесецима прије рођења и увјерите је да чува амнионске ћелије код куће.

4. Посавјетујте се с гинекологом мјесецима прије рођења и увјерите га да плаценту стави под рођење у стерилну боцу пуну леда. Можете га ставити у фосфатни пуфер са сланим раствором (ПБС, препарат овде) са неким антибиотицима (Пеницилин-Стрептомицин) ради стерилности.

5. Техничке припреме (нисам израчунао точну количину новца, која је потребна за авантуру, али то је око неколико хиљада долара, а то би могло бити јефтиније од прикупљања ћелија комерцијалним путем): Поставите стерилну капуљачу на Ваша гаража. Можете направити један од кућног прочистача зрака, за то погледајте Хоме Мицологи Лаб од Пхилипа Росса, у издању биологије у дворишту, стр. 102. Изнајмите или купите нормалан свјетлосни микроскоп (10к разлучивост ће бити довољно), центрифуга (1000 о / мин) , и купите фрижидер са течним азотом.

6. Када је постељица у вашој руци, обрадите је у року од 4 сата. Користите стерилне рукавице.

7. Ставите посуду са постељицом испод стерилне капуљаче. Узмите стерилну маказу и пажљиво одрежите спољни епителни слој. Што више сечете, добијате више матичних ћелија. Амнионски слој се механички љушти од хориона.

8. Исперите амнион у фосфатном пуферисаном сланом раствору (ПБС, препарат овде) у неколико пута (8-10Кс) да бисте уклонили крв.

9. Темељно уситните ткиво стерилним маказама.

10. Да би се ослободиле амнионске епителне ћелије, млевену амнионску мембрану инкубирајте са трипсином (0,05%) током 10 минута на 37 ° Ц. Извадите дигестирано ткиво из трипсина након 10 минута и одбаците ћелије из ове дигестије да бисте искључили остатке. Постоје различите врсте протокола за трипсин, ја овде пратим Мики ет ал.

11. Третирати преостало ткиво у другој епрувети трипсина (0,05%) током 20 минута на 37 ° Ц (урадите овај корак још једном ако је потребно да сакупите више ћелија).

12. Базирајте ћелије из других (и трећих 20 минута) дигестија.

13. Прећи ћелијску суспензију кроз цедиљку од 100 ум ћелија.

14. Фуге филтриране суспензије ћелија током 8 минута на 1200 о / мин (150-200г), на собној температури.

15. Исперите пелете ћелија са ПБС и фуге поново.

16. Израчунајте ћелије хемоцитометром и препоручљиво је да утврдите виталност ћелија искључивањем трипан плаве боје, која се заснива на принципу да живе ћелије поседују интактне ћелијске мембране које искључују одређене боје, као што је трипан плаво, док мртве ћелије не. Из једног епитела можете добити чак 10-60 милиона матичних ћелија.

17. Припремите медиј за замрзавање. Протокол замрзавања је из најбољег лабораторијског приручника, На клупи: Навигатор лабораторије Катхи Баркер: 1мл / аликвота плус 10%. Средство за замрзавање обично садржи редовне медијуме за културу, 10-20% серума и 5-10% глицерола или ДМСО.

18. Свака ампула ће узети 1 - 10 (7) ћелије (или између 4 - 10 (6) и 2 - 10 (7) ћелија) у 1 мл медија.

19. Ресуспендујте пелет у медијуму за замрзавање лаганим пипетирањем.

20. Како би се ћелије замрзле постепено и безбедно, ставите ампуле на -60 ° Ц или мање и оставите их 16-24 сата.

21. Ставите аликвоте са ћелијама у течни азот и ускладиштите их. Као што каже Цхарлес Платт у књизи Живот и смрт на ниским температурама (стр. 56): “течни душик је доступан у већини урбаних подручја (потрага за“ течним гасовима ”), и генерално је јефтин. То је нетоксично, али се мора руковати опрезно, пошто његова температура од -196 ° Ц може изазвати озбиљне повреде било којег изложеног људског ткива. Увек носите тешке рукавице и заштиту за очи. ”

22. Дајте замрзнуте ћелије лекарима, када је то потребно за поправку након Кс година.

добро: смрзнуто

Удео

Оставите Коментар